Электрофорез - это лабораторный метод, выполняемый с целью разделения молекул в соответствии с их размером и электрическим зарядом, чтобы можно было поставить диагноз, проверить экспрессию белка или идентифицировать микроорганизмы.
Электрофорез - это простая и недорогая процедура, которая используется в лабораторных условиях и в исследовательских проектах. В зависимости от цели электрофореза может потребоваться проведение других тестов и обследований, например, для постановки диагноза.
Для чего это
Электрофорез можно выполнять для нескольких целей, как в исследовательских проектах, так и в диагностике, поскольку это простой и недорогой метод. Таким образом, электрофорез можно проводить, чтобы:
- Выявление вирусов, грибков, бактерий и паразитов, при этом это приложение чаще используется в исследовательских проектах;
- Тест на отцовство;
- Проверить экспрессию белков;
- Выявление мутаций, что может быть полезно, например, при диагностике лейкозов;
- Анализировать типы циркулирующего гемоглобина, полезные при диагностике серповидно-клеточной анемии;
- Оцените количество белков в крови.
В зависимости от цели электрофореза может потребоваться проведение дополнительных тестов, чтобы врач завершил диагностику.
Как это делается
Для проведения электрофореза необходим гель, который может быть полиакриламидом или агарозой в зависимости от цели, буфер для электрофореза и ванна, маркер молекулярной массы и флуоресцентный краситель, а также оборудование для УФ- или светодиодной подсветки, также известное как трансиллюминатор.
После приготовления геля необходимо поместить специальный предмет, чтобы сделать лунки в геле, обычно называемые гребешком, и дать гелю застыть. Когда гель будет готов, просто нанесите вещества в лунки. Для этого в одну из лунок необходимо поместить маркер молекулярной массы, положительный контроль, представляющий собой известное вещество, отрицательный контроль, гарантирующий достоверность реакции, и образцы, которые необходимо проанализировать. Все образцы должны быть смешаны с флуоресцентным красителем, так как таким образом можно визуализировать полосы на трансиллюминаторе.
Гель с образцами должен быть помещен в чан для электрофореза, который содержит определенный буферный раствор, а затем устройство включено, чтобы появился электрический ток и, следовательно, разность потенциалов, которая важна для разделения частиц в соответствии с их загрузке и размеру. Время электрофоретической обработки зависит от цели процедуры и может длиться до 1 часа.
По истечении установленного времени можно просмотреть результат электрофоретической обработки через трансиллюминатор. Когда гель помещается под УФ или светодиодный свет, можно визуализировать рисунок полос: чем больше молекула, тем меньше она мигрирует, приближаясь к лунке, а чем легче молекула, тем больше миграционный потенциал.
Для подтверждения реакции необходимо, чтобы полосы положительного контроля были визуализированы, а в отрицательном контроле ничего не визуализировалось, в противном случае это указывает на наличие загрязнения, и весь процесс необходимо повторить.
Виды электрофореза
Электрофорез можно проводить для различных целей, и в зависимости от его назначения можно использовать несколько типов гелей, наиболее распространенными из которых являются полиакриламид и агароза.
Электрофорез для идентификации микроорганизмов чаще проводится в исследовательских лабораториях, однако в диагностических целях электрофорез может использоваться для выявления гематологических заболеваний и заболеваний, которые развиваются с увеличением количества белков, являясь основными типами электрофореза:
1. Электрофорез гемоглобина.
Электрофорез гемоглобина - это лабораторный метод, выполняемый для определения различных типов гемоглобина, циркулирующих в крови, что позволяет определить наличие заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина. Тип гемоглобина определяется с помощью электрофореза при определенном pH, в идеале между 8,0 и 9,0, с проверкой структуры полос, которую можно сравнить с нормальной картиной, что позволяет идентифицировать присутствие аномальных гемоглобинов.
Для чего это делается. Электрофорез гемоглобина проводится для исследования и диагностики заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина, таких как серповидно-клеточная анемия и болезнь гемоглобина C, в дополнение к тому, что он полезен для дифференциации талассемии. Узнайте, как интерпретировать результаты электрофореза гемоглобина.
2. Белковый электрофорез.
Электрофорез белков - это обследование, которое требуется врачом для оценки количества белков, циркулирующих в крови, и, таким образом, для выявления заболеваний. Этот тест проводится из образца крови, который центрифугируется для получения плазмы, части крови, состоящей, среди прочего, из белков.
После электрофореза можно визуализировать рисунок полос и, впоследствии, график, на котором указано количество каждой фракции белков, что является основополагающим для диагностики.
Для чего это делается: электрофорез белков позволяет врачу исследовать возникновение множественной миеломы, обезвоживания, цирроза, воспаления, заболевания печени, панкреатита, волчанки и гипертонии в соответствии с рисунком полос и графиком, представленным в отчете об обследовании.
Разберитесь, как это делается и как понять результат электрофореза белков.
Была ли эта информация полезна?
да нет
Ваше мнение важно! Напишите здесь, как мы можем улучшить наш текст:
Любые вопросы? Щелкните здесь, чтобы получить ответ.
Электронная почта, на которую вы хотите получить ответ:
Проверьте письмо с подтверждением, которое мы вам отправили.
Твое имя:
Причина посещения:
--- Выберите причину --- БолезньЖивите лучше Помогите другому человекуПолучите знания
Вы медицинский работник?
НетВрачФармацевтикаМедсестраНетологиБиомедицинские препаратыФизиотерапевтКосметологДругое
Библиография
- ЭНЦИКЛОПЕДИЯ БИОСФЕРА, НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ЗНАНИЙ. Электрофорез: концепции и применение. 2015. Доступно по адресу :. Доступ 24 сентября 2019 г.
- КАСВИ. Что такое электрофорез и почему он важен?. Доступно в: . Доступ 24 сентября 2019 г.
